REL PDBe PDBe PDBe 2003-08-12 2003-09-25 2005-09-25 2011-05-26 Gomez-Lorenzo MG Valle M Frank J Gruss C Sorzano COS Chen XS Donate L Carazo JM Gomez-Lorenzo MG Valle M Frank J Gruss C Sorzano CO Chen XS Donate LE Carazo JM EMBO J. 22 6205 6213 2003 14633980 doi:10.1093/emboj/cdg612 Large T antigen double hexamer on the SV40 origin of replication Large T antigen double hexamer on the SV40 origin of replication homododecamer of T antigen on the DNA 2 1.049 SV40 large T antigen Simian virus 40 SV40 0.984 0.984

Purified as described in Simanis and Lane (1985) Virology, 144:88-100; To know about purification details see Simanis V and Lane DP (1985) "An immunoaffinity purification procedure for SV40 large T antigen". Virology 144, 88-100

12 dodecameric true SV40 origin of replication Simian virus 40 SV40 0.054 0.054

DNA fragment HindIII / NcoI of pOR1 (DeLucia et al, 1986, J.Virol, 61:3649-3654

AAGCTTCCTCACTACTTCTGGAATAGCTCAGAGGCCGAGGCGGCCTCGGCCTCTGCATAAATAAAAAAAATTAGGCAGCCATGG DNA DOUBLE HELIX true singleParticle particle 7.56 7.5

The incubation buffer to do the Tag-ori complex: 3 mM ADP, 20 mM Tris (HCl) pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM KCl, 2 mM MgCl2

NEGATIVE

The sample was vitrified on a carbon-coated copper grid that was previously glow-discharged

copper grid

ETHANE 90 HOMEMADE PLUNGER

Vitrification instrument: user made plunger. Vitrification carried out at room temperature

Blot for 1 second before plunging FEI TECNAI F20 FLOOD BEAM BRIGHT FIELD FIELD EMISSION GUN 200 2.0 1.2 4.5 60000.0 64200.0 GATAN LIQUID NITROGEN 90 corrected at 175,000

Low Dose procedure

KODAK SO-163 FILM ZEISS SCAI 7 153 15 32. Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder 0 50

Particles were manually picked and rotationally and translationaly aligned using Radon transforms

each particle, only phases

C1 OTHER 27.5 FSC 0.5 CUT-OFF spider xmipp

Starting from a preliminary random conical tilt volume, search for projection orientation was done using Radon transforms (Radermacher M, 1994). CTF correction of the images during angular refinement.

13860

Phi / theta 186.00 91.000 324.00 41.000 123.00 74.000 213.00 76.000 185.00 84.000 25.000 104.00 172.00 36.000 180.00 97.000 328.00 90.000 284.00 62.000 188.00 112.00 108.00 109.00 297.00 96.000 205.00 102.00 319.00 60.000 297.00 79.000 176.00 142.00 342.00 82.000 314.00 54.000 54.000 99.000 39.000 65.000 346.00 115.00 336.00 94.000 286.00 89.000 254.00 83.000 305.00 45.000 223.00 106.00 219.00 59.000 292.00 104.00 208.00 114.00 262.00 101.00 346.00 62.000 78.000 62.000 170.00 67.000 253.00 77.000 352.00 111.00 178.00 91.000 172.00 45.000 346.00 46.000 169.00 117.00 73.000 63.000 291.00 82.000 13.000 67.000 126.00 58.000 127.00 85.000 276.00 83.000 349.00 70.000 101.00 86.000 350.00 128.00 333.00 55.000 72.000 114.00 322.00 95.000 8.0000 113.00 303.00 73.000 326.00 58.000 148.00 57.000 68.000 35.000 152.00 84.000 168.00 60.000 173.00 46.000 135.00 45.000 36.000 98.000 164.00 78.000 172.00 106.00 197.00 9.0000 103.00 85.000 23.000 147.00 123.00 96.000 242.00 149.00 20.000 73.000 281.00 101.00 118.00 108.00 305.00 54.000 140.00 81.000 15.000 77.000 213.00 70.000 86.000 132.00 329.00 64.000 165.00 82.000 24.000 107.00 89.000 59.000 221.00 102.00 347.00 94.000 248.00 108.00 112.00 27.000 265.00 90.000 190.00 20.000 185.00 118.00 242.00 69.000 295.00 92.000 191.00 99.000 253.00 22.000 232.00 38.000 151.00 126.00 283.00 88.000 233.00 73.000 132.00 74.000 293.00 95.000 27.000 110.00 293.00 136.00 170.00 89.000 260.00 71.000 112.00 144.00 337.00 73.000 143.00 87.000 179.00 94.000 68.000 66.000 223.00 79.000 157.00 113.00 275.00 35.000 358.00 109.00 211.00 87.000 290.00 93.000 347.00 107.00 205.00 44.000 101.00 72.000 246.00 65.000 164.00 68.000 130.00 97.000 345.00 109.00 193.00 102.00 122.00 122.00 254.00 62.000 145.00 56.000 292.00 77.000 350.00 55.000 134.00 67.000 233.00 78.000 15.000 99.000 197.00 58.000 296.00 83.000 246.00 89.000 18.000 106.00 308.00 66.000 21.000 42.000 149.00 101.00 211.00 81.000 313.00 91.000 15.000 103.00 300.00 99.000 153.00 109.00 108.00 142.00 191.00 90.000 345.00 101.00 144.00 144.00 97.000 94.000 224.00 82.000 123.00 105.00 270.00 82.000 239.00 50.000 162.00 69.000 103.00 154.00 2.0000 86.000 106.00 119.00 241.00 107.00 117.00 86.000 180.00 77.000 89.000 114.00 146.00 107.00 143.00 95.000 286.00 109.00 318.00 105.00 306.00 96.000 59.000 91.000 350.00 80.000 185.00 75.000 334.00 100.00 120.00 94.000 90.000 88.000 235.00 52.000 43.000 63.000 90.000 100.00 322.00 90.000 290.00 82.000 118.00 98.000 132.00 72.000 35.000 57.000 167.00 139.00 251.00 104.00 146.00 97.000 340.00 97.000 336.00 46.000 158.00 95.000 163.00 91.000 80.000 110.00 202.00 39.000 340.00 96.000 102.00 82.000 22.000 43.000 153.00 30.000 297.00 74.000 86.000 141.00 191.00 104.00 278.00 102.00 136.00 62.000 118.00 95.000 25.000 77.000 356.00 94.000 162.00 111.00 59.000 101.00 274.00 109.00 107.00 97.000 93.000 84.000 201.00 82.000 258.00 71.000 82.000 40.000 191.00 97.000 347.00 48.000 125.00 112.00 162.00 52.000 330.00 78.000 2.0000 115.00 310.00 119.00 229.00 106.00 229.00 53.000 119.00 79.000 271.00 141.00 103.00 49.000 129.00 122.00 318.00 128.00 195.00 82.000 325.00 92.000 237.00 85.000 222.00 30.000 91.000 110.00 232.00 41.000 115.00 147.00 169.00 101.00 215.00 73.000 15.000 110.00 93.000 95.000 151.00 103.00 160.00 91.000 183.00 100.00 30.000 101.00 24.000 106.00 144.00 90.000 133.00 94.000 179.00 61.000 23.000 96.000 80.000 86.000 187.00 148.00 312.00 168.00 297.00 95.000 94.000 98.000 162.00 66.000 290.00 81.000 301.00 96.000 249.00 94.000 294.00 79.000 220.00 51.000 89.000 84.000 210.00 32.000 294.00 81.000 251.00 85.000 286.00 66.000 329.00 78.000 282.00 57.000 234.00 74.000 274.00 86.000 184.00 70.000 202.00 52.000 164.00 109.00 311.00 67.000 276.00 106.00 86.000 77.000 3.0000 91.000 75.000 48.000 105.00 78.000 333.00 79.000 57.000 69.000 256.00 76.000 282.00 80.000 283.00 138.00 147.00 101.00 319.00 56.000 97.000 88.000 72.000 101.00 210.00 96.000 298.00 79.000 5.0000 70.000 210.00 72.000 289.00 100.00 38.000 132.00 335.00 70.000 259.00 144.00 35.000 116.00 33.000 90.000 3.0000 90.000 145.00 108.00 304.00 40.000 294.00 103.00 309.00 140.00 235.00 108.00 233.00 87.000 113.00 71.000 214.00 57.000 8.0000 66.000 244.00 102.00 309.00 107.00 26.000 107.00 256.00 80.000 102.00 107.00 331.00 106.00 74.000 96.000 314.00 88.000 175.00 23.000 267.00 67.000 269.00 84.000 325.00 82.000 342.00 137.00 276.00 126.00 148.00 94.000 149.00 93.000 77.000 136.00 237.00 43.000 196.00 52.000 131.00 87.000 310.00 96.000 298.00 101.00 308.00 43.000 338.00 83.000 130.00 98.000 264.00 89.000 264.00 93.000 111.00 128.00 287.00 120.00 114.00 64.000 317.00 43.000 287.00 38.000 87.000 72.000 2.0000 73.000 299.00 73.000 23.000 49.000 296.00 110.00 338.00 70.000 53.000 75.000 303.00 81.000 36.000 23.000 333.00 104.00 268.00 99.000 211.00 69.000 348.00 55.000 285.00 99.000 109.00 136.00 109.00 21.000 267.00 102.00 100.00 93.000 278.00 109.00 338.00 134.00 190.00 73.000 89.000 90.000 181.00 85.000 317.00 93.000 93.000 121.00 141.00 104.00 280.00 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1N25 RIGID BODY FIT

The helicase hexamer was fitted manually using program O in both C-terminal domains of the Tag-ori complex,